基因芯片技术是什么?基因芯片到底怎么工作的?基因芯片技术作用
基因芯片技术是什么?
基因芯片也称DNA微阵列,是生物芯片的一种。基因芯片原理最初是由核酸的分子杂交衍生而来的,即应用已知序列的核酸探针对未知序列的核酸序列进行杂交检测DNA芯片技术,实际上就是一种大规模集成的固相杂交。是指在固相支持物上原位合成( situ synthesis)寡核苷酸或者直接将大量预先制备的DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面,然后与标记的样品杂交。通过计算机对杂交信号的检测分析,得出样品的遗传信息(基因序列及表达的信息)。由于常计算机硅芯片作为固相支持物,所以称为DNA芯片。
基因芯片采用大量特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针,有规律地固定于与光电测量装置相结合的硅片、玻璃片、塑料片或尼龙基底等固体支持物上,形成二维阵列,与待测的标记样品的基因按碱基对配对原理进行杂交,从而检测特定基因。
基因芯片到底怎么工作的?
1、芯片制备-目前制备芯片主要以玻璃片或硅片为载体,采用原位合成和微矩阵的方法将寡核苷酸片段或cDNA作为探针按顺序排列在载体上。芯片的制备除了用到微加工工艺外,还需要使用机器人技术。以便能快速、准确地将探针放置到芯片上的指定位置。
2、样品制备-生物样品往往是复杂的生物分子混合体,除少数特殊样品外,一般不能直接与芯片反应,有时样品的量很小。所以,必须将样品进行提取、扩增,获取其中的蛋白质或DNA、RNA,然后用荧光标记,以提高检测的灵敏度和使用者的安全性。
3、杂交反应-杂交反应是荧光标记的样品与芯片上的探针进行的反应产生一系列信息的过程。选择合适的反应条件能使生物分子间反应处于最佳状况中,减少生物分子之间的错配率。
4、信号检测和结果分析-杂交反应后的芯片上各个反应点的荧光位置、荧光强弱经过芯片扫描仪和相关软件可以分析图像,将荧光转换成数据,即可以获得有关生物信息。
基因芯片技术作用
1、基因芯片主要是用作基因功能的研究;
2、通过基因芯片人们可以大规模、高通量地对成千上万个基因进行同时研究,从而解决了传统核酸印迹杂交技术操作繁杂、自动化程度低、操作程序数量少、检测效率低等不足;
3、通过设计不同的探针阵列使用的分析方法,可使该技术具有不同的应用价值。
责任编辑:hnmd003
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